सोडियम साइट्रेट बफर अक्सर आरएनए अलगाव के लिए उपयोग किया जाता है, क्योंकि यह आरएनए किस्में के आधार हाइड्रोलिसिस को कम करता है, जिससे यह एमआरएनए शुद्धि के लिए अमूल्य है जीनोमिक शोध, और प्रतिलेखन का अध्ययन करने के लिए। साइट्रेट-आधारित बफ़र्स भी निश्चित ऊतक तैयारी में एंटीजन का पता लगाने में सहायता करते हैं, क्योंकि वे एंटीजन और फिक्सेशन मीडिया के बीच बने क्रॉस-लिंक को तोड़ते हैं।
निम्नलिखित आसान चरणों के साथ, एक 10 मिनट के भीतर 6 (अम्लीय) के पीएच के साथ एक सोडियम साइट्रेट बफर बना सकता है।
सोडियम साइट्रेट बफर के लिए सामग्री
सोडियम साइट्रेट बफर बनाने के लिए कुछ सामग्रियों की आवश्यकता होती है। साइट्रिक एसिड के साथ, केवल 1M सोडियम हाइड्रॉक्साइड, आसुत जल और एक कैलिब्रेटेड पीएच जांच की आवश्यकता होती है। सोडियम साइट्रेट वैकल्पिक है।
बफर बनाने के लिए 1 लीटर स्नातक किए गए सिलेंडर, एक 1-लीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क और तीन 1 लीटर मीडिया बोतलों की भी आवश्यकता होती है। अंत में, आपको एक चुंबकीय हलचल बार और एक चुंबकीय सिर की आवश्यकता होगी। इन सभी सामग्रियों को स्कूल में पाया जा सकता है, कार्य-स्थल की प्रयोगशालाएँ या ऑनलाइन खरीदा जा सकता है या विशेष सामान की दुकानों पर।
दो विकल्प बफ़र बनाने के लिए
सोडियम साइट्रेट बफ़र बनाने के दो तरीके हैं, जो आपके लिए सुलभ सामग्रियों पर निर्भर करता है।
- यदि आपके पास साइट्रिक एसिड और संयुग्म आधार दोनों हैं, तो 21 ग्राम मिलाकर प्रत्येक का स्टॉक समाधान बनाएं आसुत जल के 1 लीटर में साइट्रिक एसिड, और आसुत के 1 लीटर में 29.4 ग्राम सोडियम साइट्रेट पानी।
- यदि आपके पास केवल हाथ पर साइट्रिक एसिड है, तो आसुत जल के सिर्फ 1 लीटर के तहत 2.1 ग्राम मिलाएं।
मिश्रण साइट्रिक एसिड और सोडियम साइट्रेट समाधान
सोडियम साइट्रेट समाधान के 18 मिलीलीटर के साथ साइट्रिक एसिड समाधान के 82 मिलीलीटर को मिलाएं। इसके लिए, मिश्रण की मात्रा को 1 लीटर से कम करने के लिए पर्याप्त आसुत पानी डालें।
पीएच को समायोजित करना
धीरे से एक चुंबकीय रकाब के साथ समाधान को हिलाते हुए, मिश्रण के पीएच को 6.0 तक समायोजित करने के लिए 1M सोडियम हाइड्रॉक्साइड का उपयोग करें। फिर, एक बड़ा फ्लास्क के साथ, समाधान के अंतिम कुल मात्रा को ठीक 1 तक लाने के लिए अधिक आसुत जल जोड़ें लीटर।