RFLP और डीएनए विश्लेषण अनुप्रयोग

प्रतिबंध टुकड़ा लंबाई बहुरूपता (RFLP) आनुवंशिक विश्लेषण का एक आणविक तरीका है जो व्यक्तियों को अद्वितीय पैटर्न के आधार पर पहचानने की अनुमति देता है प्रतिबंध वाले एंजाइम डीएनए के विशिष्ट क्षेत्रों में काटने।

RFLP एनालिसिस के रूप में भी जाना जाता है, तकनीक इसका लाभ उठाती है बहुरूपताओं व्यक्तिगत लोगों के आनुवंशिक कोड में। भले ही किसी प्रजाति के सभी सदस्यों में अनिवार्य रूप से एक ही जेनेटिक मेकअप होता है, ये मामूली अंतर फ़िनोटाइप में भिन्नता के लिए होते हैं, जैसे कि उपस्थिति या चयापचय, व्यक्तियों के बीच।

RFLP विश्लेषण तकनीक में किसी विशेष क्षेत्र को काटना शामिल है डीएनए ज्ञात परिवर्तनशीलता के साथ, प्रतिबंध एंजाइमों के साथ, फिर agarose जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा डीएनए के टुकड़े को अलग करना और टुकड़े और रिश्तेदार आकारों की संख्या का निर्धारण करना।

एक प्रतिबंध एंजाइम एक एंजाइम, एक प्रोटीन अणु है, जो प्रतिबंध स्थलों पर डीएनए को काटता है। संक्षेप में, डीएनए नमूना टूट गया है और प्रतिबंध एंजाइम द्वारा पच जाता है। परिणामस्वरूप टुकड़े अपनी लंबाई के अनुसार अलग हो जाते हैं, और प्रत्येक व्यक्तिगत परीक्षण के लिए टुकड़े के आकार का पैटर्न अलग-अलग होगा।

पूर्ण RFLP प्रक्रिया में जांच लेबलिंग, डीएनए विखंडन, वैद्युतकणसंचलन, सोख्ता, संकरण, धुलाई और ऑटोरैडियोग्राफी की आवश्यकता होती है। पता लगाया RFLP को ऑटोरैडियोग्राफी में एक्स-रे फिल्म का उपयोग करके कल्पना की जाती है, जहां इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा एक दूसरे से अलग होने के बाद डीएनए के टुकड़े देखे जा सकते हैं और उनका विश्लेषण किया जा सकता है।

RFLP विश्लेषण के लिए कुछ अनुप्रयोगों में शामिल हैं:

• डी ऑक्सी राइबो न्यूक्लिक एसिड अंगुली का निशान: अपराधों के दृश्यों पर एकत्रित साक्ष्य नमूनों के आधार पर संदिग्धों की पहचान करने के लिए फोरेंसिक वैज्ञानिक RFLP विश्लेषण का उपयोग कर सकते हैं।
• पितृत्व: RFLP का उपयोग पितृत्व के निर्धारण में या वंश के अनुरेखण के लिए भी किया जाता है।
• आनुवंशिक विविधता: तकनीक का उपयोग वन्यजीवों के विकास और प्रवास के अध्ययन, पशु आबादी में प्रजनन पैटर्न का अध्ययन करने और कुछ बीमारियों का पता लगाने और निदान करने में किया जा सकता है।

जीनोम में भिन्नता का पता लगाने के RFLP का उपयोग करने की तकनीक जीनोम मैपिंग और आनुवंशिक रोग विश्लेषण में एक महत्वपूर्ण उपकरण है। यदि किसी विशेष गुणसूत्र में किसी विशेष रोग जीन का स्थान खोजा जा रहा है, तो शोधकर्ता ऐसा करेंगे बीमारी के साथ एक परिवार के सदस्यों के डीएनए का विश्लेषण करें, फिर RFLP में विरासत के समान पैटर्न देखें जेनेटिक तत्व।

एक बार जब एक रोग जीन स्थानीय हो जाता है, तो परिवार के अन्य सदस्यों पर RFLP विश्लेषण करने से उत्परिवर्ती जीन का वाहक प्रकट हो सकता है या अन्य रोग जोखिम का संकेत हो सकता है। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि RFLP तकनीक का व्यापक रूप से अब उपयोग नहीं किया जाता है कि फोरेंसिक विज्ञान और कई अन्य क्षेत्रों में डीएनए विश्लेषण के लिए नए, अधिक मजबूत तकनीकों का उपयोग किया जाता है।

दुर्भाग्य से, RFLP विश्लेषण तकनीक थकाऊ और धीमी है। नमूना डीएनए की एक बड़ी मात्रा की आवश्यकता के अलावा - नमूना आमतौर पर एक चौथाई के आकार के बारे में होना चाहिए, जो है डीएनए नमूनों के लिए अपेक्षाकृत बड़ी - प्रक्रिया, जांच लेबलिंग से लेकर धुलाई और ऑटोरैडियोग्राफी तक, एक पूरे महीने तक का समय लग सकता है पूर्ण।

मानव जीनोम परियोजना के परिणामों ने RFLP की आवश्यकता को बहुत बदल दिया है। परियोजना ने मानव कोशिकाओं, मानव जीनोम में पाए जाने वाले डीएनए के संपूर्ण अनुक्रम को निर्धारित करने और मानव जीनोम में सभी जीनों की पहचान के लिए अनुमति दी।